紹普通的遠場熒光顯微鏡，使用聚焦的遠場光束照射熒光分子，由于衍射效應(yīng)的存在，樣品上形成一個有限尺寸的光斑，光斑之內(nèi)的熒光分子全部被激發(fā)并發(fā)出熒光。因此光斑內(nèi)的樣品的細節(jié)特征無法被分辨，激發(fā)光斑的尺寸難以改變，但如果可以使光斑內(nèi)周圍區(qū)域的熒光分子處于某種暗態(tài)而不發(fā)光，那么探測器只能檢測到光斑中心區(qū)域處于亮態(tài)的熒光分子。這樣就減小了樣品的有效發(fā)光面積，從而突破了衍射極限的限制。熒光分子需要在激發(fā)態(tài)進行自發(fā)輻射發(fā)出熒光，因此激發(fā)態(tài)是亮態(tài)，STED中采用熒光分子的基態(tài)作為暗態(tài)。強制使得熒光分子處于暗態(tài)的機制采用受激輻射。當(dāng)激發(fā)光光斑內(nèi)的熒光分子吸收了激發(fā)光處于激發(fā)態(tài)后，用另一束STED光束照射樣品，使 ...
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于激光的廣域熒光顯微鏡的定量分析可能非常具有挑戰(zhàn)性。在這種情況下，使用a|TopShape可以提供幫助。將顯微鏡裝置中的高斯光束轉(zhuǎn)換為均勻的平頂輪廓，可確保顯微鏡載玻片的均勻照明，從而使圖像更容易識別。在CREOL的一篇I. Khaw等人的論文中了解更多關(guān)于a|TopShape在寬場熒光顯微鏡中的使用，可以在這里下載：https://www.asphericon.com/fileadmin/user_upload/PDFs/Flat-field_illumination_for_quantiative_fluorescence_imaging_Han_Fuchs_2018.pdf基于激光的顯微 ...
TDC及TCSPC的技術(shù)原理-TCSPC高精度時間相關(guān)單光子計數(shù)模塊TDC技術(shù)和TCSPC技術(shù)都是用來進行時間測量的技術(shù)手段，雖然應(yīng)用范圍大致相同，但是原理卻不同。TDC原理如右圖所示。來自單光子探測器的光電子信號脈沖和來自激光器的參考脈沖輸入到延遲鏈中。時序邏輯查看延遲鏈中的數(shù)據(jù)，識別單光子和及激光脈沖的開始-停止對，并以此方式確定單光子在激光脈沖序列中的時間位置。然后，可以根據(jù)這些數(shù)據(jù)，建立通常的TCSPC/FLIM光子分布。TCSPC技術(shù)所基于的原理是：在記錄低強度、高重復(fù)頻率的脈沖信號時，由于光強很低，以至于在一個信號周期內(nèi)探測到一個光子的概率遠遠小于1。因此，沒有必要考慮在一個信號周 ...
分辨率來測量熒光波動引起的相關(guān)性。在 ISM 架構(gòu)中測量的這種相關(guān)性，然后被用作具有高達 4倍增強橫向分辨率和增強軸向分辨率的超分辨率圖像的對比度。僅用幾毫秒的像素駐留時間就可以獲得高信噪比的超分辨率圖像。單光子探測器陣列SPAD23技術(shù)源于代爾夫特理工大學(xué)和洛桑聯(lián)邦理工學(xué)院 7 年的研究工作和 6 項獨特技術(shù)。它是由23個六角形封裝的單光子雪崩二極管組成的探測器陣列(SPADs)，具有更高的靈敏度和更低的噪聲。這款單光子探測器陣列SPAD23在其寬探測譜段內(nèi)擁有>50%的探測效率，<100cps的暗計數(shù)水平，且因其獨特的半導(dǎo)體工藝及設(shè)計實現(xiàn)了填充因子＞80%。這款帶有時間標(biāo)記功能 ...
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）色心、單個熒光分子、碳納米管和量子點等。反聚束實驗則是鑒別單光子源的重要表征方法。知識拓展”NV（Nitrogen-Vacancy）色心是金剛石中的一種點缺陷。金剛石晶格中一個碳原子缺失形成空位，近鄰的位置有一個氮原子，這樣就形成了一個NV色心。反聚束效應(yīng)是一種量子力學(xué)效應(yīng)，它揭示了光的類粒子行為。它是由于單光子源一次只能發(fā)射一個光子而產(chǎn)生的現(xiàn)象。由于兩次光子發(fā)射之間必須完成一個激發(fā)和弛豫循環(huán)，兩次光子發(fā)射之間的最小間隔主要取決于單光子源的激發(fā)態(tài)壽命。當(dāng)將發(fā)光信號分成兩束，采用兩個檢測器同時探測，每個光子只能被其中一個檢測器探測到。即在同一時刻僅有一個檢測器可以探測到光子。反聚束效應(yīng)會導(dǎo)致兩 ...
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