大器模擬受激拉曼散射顯微鏡拉曼效應(yīng)是由C.V.拉曼在20世紀(jì)20年代發(fā)現(xiàn)。它是一種廣泛使用的光譜方法來確定分子的振動(dòng)模式。與其他分析化學(xué)方法相比,光譜方法提供了高空間分辨率。不需要直接接觸就可以獲得化學(xué)信息。振動(dòng)光譜提供了合理的化學(xué)特異性,而不需要額外的標(biāo)簽。然而,自發(fā)拉曼效應(yīng)是一個(gè)弱散射過程。對(duì)于成像和顯微鏡的應(yīng)用來說,獲得一個(gè)視場可能需要幾個(gè)小時(shí)的信號(hào)整合時(shí)間。因此,相干拉曼散射方法,如刺激拉曼散射效應(yīng),現(xiàn)在被廣泛用于拉曼成像。在這個(gè)應(yīng)用說明中,我們將描述Moku:Lab的鎖相放大器是如何在波士頓大學(xué)的刺激拉曼成像裝置中實(shí)現(xiàn)的。介紹拉曼光譜是一種非破壞性的分析化學(xué)技術(shù)。它直接探測樣品的振動(dòng) ...
00 nm。拉曼散射效率與激發(fā)波長的四次方成反比。因此,較低激發(fā)波長(UV和可見光)的激光器比紅外光源產(chǎn)生更好的拉曼信號(hào)。我們使用了一種低成本和易于獲得的綠色(~ 532 nm)激光筆,二極管泵浦固態(tài)激光器(DPSS)作為激發(fā)源。內(nèi)置的Nd:YAG和KTP晶體將激光二極管的主發(fā)射波長808 nm先轉(zhuǎn)換為1064 nm再轉(zhuǎn)換為532 nm。有利的是,該激光筆帶有必要的電子驅(qū)動(dòng)電路、被動(dòng)散熱裝置和準(zhǔn)直透鏡組件,無需額外的組件。激光束直徑為~ 2.5 mm,光輸出功率為~ 70 mW,足以產(chǎn)生容易被探測到的拉曼散射光子。測量的光譜剖面顯示,中心波長和半高寬分別為531.8 nm和0.78 nm。由此 ...
儀的優(yōu)點(diǎn)由于拉曼散射過程固有的低效率,拉曼顯微鏡的一個(gè)主要技術(shù)限制是信號(hào)采集時(shí)間過長。例如,使用自發(fā)拉曼微光譜對(duì)生物標(biāo)本進(jìn)行化學(xué)分析或成像需要幾十秒或幾分鐘的時(shí)間。表面增強(qiáng)拉曼散射(SERS)、相干反斯托克斯拉曼散射(CARS)和受激拉曼散射(SRS)被開發(fā)用來增強(qiáng)拉曼散射信號(hào),以提高拉曼分析或成像的速度。然而,在SERS中使用金屬納米顆粒對(duì)生物應(yīng)用造成了一些缺點(diǎn),CARS或SRS通常局限于查詢一個(gè)振動(dòng)模式,而不是同時(shí)測量標(biāo)本的全拉曼光譜。在不使用外源標(biāo)記或納米顆粒的情況下獲得完整的光譜(例如400-2000 cm-1)可以更好地了解樣品中的化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)。為了提高自發(fā)拉曼光譜的分析通量或 ...
。捕獲粒子的拉曼散射信號(hào)通過二向色鏡從激光中分離出來,經(jīng)過透鏡和多縫陣列后,直接進(jìn)入光譜儀。圖2采用1340 × 100像素的多通道CCD 對(duì)所有捕獲粒子的拉曼光譜進(jìn)行檢測。圖2為CCD相機(jī)捕獲的拉曼信號(hào)。通過調(diào)節(jié)兩排激光聚焦陣列之間的間隔距離,可以很好地分離兩排拉曼信號(hào),沒有串?dāng)_。然而,每一行有三個(gè)拉曼信號(hào)顯示了重疊和疊加,這是不可避免的。為了分解每一行疊加的光譜并檢索單個(gè)光譜,可使用調(diào)制多焦檢測技術(shù)進(jìn)行光譜采集和重建。圖3調(diào)制多焦檢測的第一種方法是激勵(lì)多焦陣列的調(diào)制,如照明調(diào)制。一條線上使用三個(gè)激光焦點(diǎn)(圖3(a))捕獲兩個(gè)3 μm聚苯乙烯珠(圖3(b))。當(dāng)三個(gè)激光聚焦都處于“開”狀態(tài)時(shí) ...
彈性散射,即拉曼散射是一種非常弱的效應(yīng)。拉曼效應(yīng)的光學(xué)發(fā)射“截面”很小。然而使用光學(xué)工程方法可以有效地處理小的截面。許多光學(xué)系統(tǒng)會(huì)有微量的光泄漏,而且?guī)缀跛械南到y(tǒng)/材料都會(huì)自動(dòng)熒光。需要有方法來處理這些影響。拉曼效應(yīng)的一個(gè)具有挑戰(zhàn)性的方面是光譜儀或分析工具本身的波長/頻率分析部分。許多用于拉曼應(yīng)用的光譜儀具有非常大的物理尺寸。光譜儀分析段的尺寸非常重要,整個(gè)拉曼系統(tǒng)理想地適合在一個(gè)小的區(qū)域內(nèi),并具有足夠的信號(hào)處理能力來分析光譜。拉曼光譜和自熒光測量是研究臨床和生化樣品的重要方法。自熒光強(qiáng)度和拉曼強(qiáng)度/效率以及由此產(chǎn)生的光譜特性可能取決于許多因素,包括材料的化學(xué)組成、材料環(huán)境,還可能取決于材料 ...
調(diào)制檢測到的拉曼散射,但與基于鏡像的SLM設(shè)備相比,光學(xué)吞吐量通常較低,而且激光光子通常比拉曼光子更容易獲得。此外,相位控制對(duì)相干單色激光的影響提供了可以利用的附加效應(yīng),如用于多路復(fù)用光束轉(zhuǎn)向的全息相位圖。更多詳情請(qǐng)聯(lián)系昊量光電/歡迎直接聯(lián)系昊量光電關(guān)于昊量光電:上海昊量光電設(shè)備有限公司是光電產(chǎn)品專業(yè)代理商,產(chǎn)品包括各類激光器、光電調(diào)制器、光學(xué)測量設(shè)備、光學(xué)元件等,涉及應(yīng)用涵蓋了材料加工、光通訊、生物醫(yī)療、科學(xué)研究、國防、量子光學(xué)、生物顯微、物聯(lián)傳感、激光制造等;可為客戶提供完整的設(shè)備安裝,培訓(xùn),硬件開發(fā),軟件開發(fā),系統(tǒng)集成等服務(wù)。您可以通過我們昊量光電的官方網(wǎng)站www.auniontech. ...
表面位置收集拉曼散射信號(hào)來檢索分層次地表信息的技術(shù)。圖1由于β-激動(dòng)劑在豬肉樣品中的分布不均勻,當(dāng)只檢測肉的表面時(shí),可能會(huì)出現(xiàn)漏檢的情況。如圖1所示,偏移譜對(duì)來自地表和次地表的拉曼信號(hào)表現(xiàn)出不同的靈敏度。隨著源探測距離的增加,深層拉曼信號(hào)的貢獻(xiàn)逐漸超過表層拉曼信號(hào)的貢獻(xiàn)。因此,β-激動(dòng)劑可以在豬肉的更深層次檢測,使檢測更加準(zhǔn)確。空間偏移拉曼光譜是在距離光照點(diǎn)空間偏移的一系列點(diǎn)沿樣品表面采集拉曼信號(hào),可從擴(kuò)散散射介質(zhì)中提取亞表面拉曼信息。增加空間偏移增加了來自更深層的信號(hào)貢獻(xiàn),使其逐漸超過來自頂部表面材料的信號(hào),從而增強(qiáng)了更深層的信號(hào),同時(shí)衰減了表面信號(hào)。隨著偏移距離的增加,光譜變化的模式允許從 ...
文。一.簡介拉曼散射光譜為生物分子的特異性檢測和分析提供了化學(xué)鍵的固有振動(dòng)指紋。那么什么是受激拉曼散射顯微鏡?受激拉曼散射(SRS)顯微技術(shù)是一種相對(duì)較新的顯微技術(shù),是一種相干拉曼散射過程,允許使用光譜和空間信息進(jìn)行化學(xué)成像[18],由于相干受激發(fā)射過程[1]能產(chǎn)生約103-105倍的增強(qiáng)拉曼信號(hào),可以實(shí)現(xiàn)高達(dá)視頻速率(約25幀/s)[2]的高速成像。SRS顯微鏡繼承了自發(fā)拉曼光譜的優(yōu)點(diǎn), 是一種能夠快速開發(fā)、label-free的成像技術(shù),同時(shí)具有高靈敏度和化學(xué)特異性[3-6], 在許多生物醫(yī)學(xué)研究的分支顯示出應(yīng)用潛力,包括細(xì)胞生物學(xué)、脂質(zhì)代謝、微生物學(xué)、腫瘤檢測、蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊和制藥[7- ...
是另一種相干拉曼散射(CRS)過程,其激發(fā)條件與共振CARS相同。與自發(fā)拉曼散射不同,在自發(fā)拉曼散射中,樣品被一個(gè)激發(fā)場照亮,SRS中兩個(gè)激發(fā)場在泵浦頻率ωp和斯托克斯頻率ωs處重合在樣品上。如果激發(fā)束的差頻Δω = ωp?ωs與焦點(diǎn)內(nèi)分子的振動(dòng)頻率Ω相匹配,即分子躍遷由于分子躍遷的刺激激發(fā),速率提高。分子居群從基態(tài)通過虛態(tài)轉(zhuǎn)移到分子的振動(dòng)激發(fā)態(tài)(圖1A)。這與自發(fā)拉曼散射相反,自發(fā)拉曼散射從虛態(tài)到振動(dòng)激發(fā)態(tài)的轉(zhuǎn)變是自發(fā)的,導(dǎo)致信號(hào)弱得多。圖1.受激拉曼散射原理(A) SRS的能量圖。泵浦和斯托克斯束的共同作用通過虛態(tài)有效地將樣品中的分子從基態(tài)轉(zhuǎn)移到第一振動(dòng)激發(fā)態(tài)。被激發(fā)的振動(dòng)狀態(tài)可以通過調(diào)節(jié) ...
的真?zhèn)闻c自發(fā)拉曼散射相比,CRS技術(shù)可以產(chǎn)生更強(qiáng)的振動(dòng)敏感信號(hào)。CRS技術(shù)在光學(xué)顯微鏡中的普及與這些大大提高的信號(hào)水平密切相關(guān),這使CRS顯微鏡的快速掃描能力成為可能。然而,除了更強(qiáng)的振動(dòng)信號(hào)之外,相干拉曼相互作用還提供了豐富的探測機(jī)制,用于檢查各種各樣的分子特性。一般來說,CRS技術(shù)比自發(fā)拉曼技術(shù)對(duì)介質(zhì)的拉曼響應(yīng)提供了更詳細(xì)的控制。所以在實(shí)際搭建相干拉曼系統(tǒng)時(shí),會(huì)有諸多問題。當(dāng)?shù)冖俅螛?gòu)建CARS或SRS顯微鏡時(shí),很難確定PMT或鎖相放大器探測器上觀察到的信號(hào)的來源。然而,可以使用一個(gè)簡短的檢查表來驗(yàn)證信號(hào)的身份。通常情況下,應(yīng)使用強(qiáng)諧振樣品(例如,兩個(gè)蓋卡片之間的一層薄十二烷),并對(duì)樣品施加 ...
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