何,發色團或熒光團在單位時間內產生的激發-發射循環次數都不能超過一定數量。因此,信號不能通過增加功率來增強,因為它實際上已經飽和。克服這第②個限制的一個邏輯方法是并行化激勵過程,并使用一種可以同時從樣本的多個點激勵和獲取信號的方案。傳統的寬視場照明正是這樣做的。然而對于非線性光學方法,如雙光子熒光顯微鏡,寬視場照明不是一個實用的選擇,因為現有的超快脈沖激光源不能提供足夠的功率來同時激發整個視場。雖然超快激光不能照亮整個領域,但它們的能量足以同時照亮許多感興趣的點。困難在于有效地將光線重新分配到只需要關注的區域。純相位型SLM非常適合這項任務,它們可以動態地調整可用于成像和光刺激的活動波束的數量 ...
M有利于探測熒光團的分子環境,以了解光強測量無法闡明的熒光團行為。圖1中概述了時域和頻域的FLIM測量,并在下面進行詳細描述。簡單地說,時域熒光壽命測量使用短脈沖光進行激發(相對于樣品的壽命較短),然后直接(即通過門控檢測或脈沖采樣)或使用時間分辨電子技術記錄熒光分子的指數衰減如圖1(a)及1(b)。另外,頻域技術也可以測量熒光壽命如圖1(c)和1(d)。這里,激勵是連續的,隨著時間的推移,振幅調制為正弦波。熒光信號的相位和振幅隨激發波的變化而變化。通過繪制在一定調制頻率范圍內的相位變化,可以看到熒光團的相位延遲和振幅調制如圖1(d)。得到的熒光正弦信號可以在頻域解調,以量化熒光強度指數衰減引 ...
熒光是分子(熒光團)通過發射可檢測的光子(時間尺度為)衰減到基態的輻射過程。熒光發射發生在激發電子能級最低的位置(S1)。這種來自最低激發電子能級的強制發射確保了發射光譜保持不變,并且與激發波長無關。由于振動弛豫和內部轉換中的能量損失,發射的熒光光子的能量較低(即發射發生在比激發更長的波長)。這種發射波長的位移稱為斯托克斯位移。另一個主要發光過程,磷光,通過被稱為系統間交叉(ISC)的過程發生在激發時電子能量躍遷到三元態能級(T1;T2;:::;Tn)。三重態的電子具有平行自旋,這些電子躍遷是“自旋禁止的”,通過發射一個磷光光子或ISC反轉和發射一個延遲的熒光光子,導致向地能級的緩慢躍遷。磷光 ...
能夠充分激發熒光團。在比較單束和五束成像模式的實驗中,我們將DOE保留在原位,并在兩種實驗中生成5個小波束,它的區別是在單束實驗中,我們簡單地在中間成像平面放置一個簡單的虹膜隔膜,作為四個小波束路徑上的屏障,只允許一個通過)。在這些條件下,在800 nm處,單個中心光束對樣品的功率為24 mW,而所有五束光的功率之和對樣品的功率為108 mW,其他四束的平均功率為21 mW,每個都在平均值的5%以內。檢鏡掃描與單光束雙光子光柵掃描成像相同,并使用放大光電倍增管(PMT)進行檢測(PMT: H7422-P40 Hamamatsu, Bridgewater, NJ, USA;放大器:信號恢復AME ...
記目的開發的熒光團顯示高達倍的振動響應的出色增強。結果是這種熒光探針可以通過CRS工藝在亞微米濃度下檢測到。這是重要的,因為它開辟了在多標簽樣品中映射不同探針的可能性,不同探針的數量受限于拉曼線的帶寬,而不是熒光的帶寬。由于檢測通道之間的串擾,在熒光顯微鏡中使用四個以上探針標記樣品具有挑戰性,而在共振增強SRS成像中,多探針標記可以擴展到數十個不同的探針。就多重成像而言,這種能力是一個巨大的勝利,因為許多細胞生物學研究需要多個分子參與者的可視化來揭示細胞內的過程和途徑。通過共振增強SRS提供的多路復用能力可以進一步推動到更低的探針濃度。通過讓探針選擇性僅由SRS激發過程決定,原則上可以放寬檢測 ...
alk是由于熒光團(如FITC和Cy3)的激發和發射光譜的波長范圍有所交集。即使Cy3熒光團是較合適被綠色(~550 nm)光激發,它同樣也能被青色(475 nm)光激發到足夠的程度,在圖2中很容易被檢測到。通過將四帶通多邊分束器和發射濾光片改為單帶通二向色鏡和發射濾光片來消除crosstalk信號,從而在檢測系統的發射側實現了更精確的阻擋。這種解決方案是一種妥協,因為它以速度為代價提高了分辨率。當然在熒光成像時,我們需要盡可能的去減小bleedthrough以及crosstalk的影響選擇熒光染料時,應盡量選擇發射光譜帶寬較窄的同時使用多種熒光染料時,應盡量選擇光譜間沒有重疊的,以免產生信號 ...
等光譜相似的熒光團起到激發作用。同樣也有針對細胞遺傳學檢測實驗中熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)對475-600nm區域進行輸出的SOLA FISH型號。以及提供zui廣泛光譜覆蓋范圍,用于激發熒光團(Cy7和ICG)近紅外輸出的LED白光光源SOLA V-nIR 和 U-nIR。滿足您各種所需波長的需求。Lumencor的LED白光光源擁有精確控制的快速調節,可以對光源的輸出功率進行調節。LED光源所產生的熱輻射較低,不會對于微流控反應器產生過多的熱量影響,從而保證反應的精度和穩定性。SOLA系列的LED白光光源耗電量較低,即開即 ...
,特別設計的熒光團優先在腫瘤中積聚。當用適當波長的光激發時,這些材料發出熒光,以對比的偽色實時顯示腫瘤和其他結構。這支持更完整的腫瘤切除和更好的患者預后。大多數FGS熒光團被650-810 nm光譜范圍內的單色光激發。那些具有近紅外照明的熒光特別有效,因為更大的穿透深度可以顯示地下生長。此外,一些臨床批準的染料被紫色(405 nm)和青色(490 nm)輸出激發。由于短波長的穿透深度有限,這些材料通常應用于表面病變。傳統上,熒光成像系統包含激光,這可能是昂貴的,復雜的,而且往往喜怒無常。光纖耦合LED在這種應用中的優勢首先是堅固性——當生命受到威脅時,系統不會失敗。LED足夠堅固,可以承受在醫 ...
長設置為目標熒光團常規激發所需波長的兩倍。在且僅在束腰處,聚焦的峰值光強超過雙光子激發的閾值。這提供了固有的3D分辨率,并消除了對有損耗的共聚焦孔的需要。然而,這兩種技術都受到實際成像中的需要取舍的負面影響,例如以捕獲代謝過程所需的幀率在組織內部進行更深層次成像的能力。此外,由于顯微鏡光學器件的像差,或者更隱蔽地,由樣品組織本身的光學性質,分辨率可能會受到負面影響。Sandstr?m解釋說,將聲光偏轉器(AOD)運用在共聚焦顯微鏡中,代替傳統的振鏡掃描激光來解決這些限制。在聲光結構中,聲波被應用于某些類型的光學透明材料,如晶體,引起材料折射率的變化。這種折射率的變化使穿過材料的光發生偏轉。通過 ...
需要成像多種熒光團的問題。我們期待Lumencor提供照明,以支持我們非常苛刻和廣泛的顯微鏡成像需求。來自尼康影像中心的評價無疑是對我們極大的肯定,Lumencor光源能夠很好的適配包括尼康在內主流的顯微鏡,容易集成到您的顯微系統中,滿足您生物研究方面的各種需求。您可以從尼康的官網上看到https://www.microscope.healthcare.nikon.com/bioimaging-centers/nic-and-cofe/uc-san-diegoUCSD的尼康影像中心的大FOV寬場系統、高內涵分析(HCA)系統、N-STORM/TIRF/CSU-X1 超分辨率和轉盤式共聚焦系統均 ...
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